分光光度計是理化分析中zui常用的儀器。它的基本原理是建立在光與物質相互作用的基礎上，當光子和某一溶液中吸收輻射的物質分子相碰撞時，就發生吸收，測量其吸光度值的大小可反映某種物質存在的量的多少。光的吸收程度與濃度有一定的比例關系,這就是的比直定律。該定律成立的必要條件是單色光(單一波長光)照射樣品。為了使該定律具有良好的線性，對測量濃度有一定的范圍要求。也就是吸光度值控制在0.2～0.7之間，并且要求單色光垂直照射樣品，試樣要均勻。一臺性能優良的分光光度計，必須有一個高性能的光路系統即單色儀。單色儀有兩類:一類是以玻璃三棱鏡為色散元件組成，另一類是由光柵為色散元件組成。兩種單色儀各有利弊，用石英玻璃做成的單色儀，在紫外光區有較高的色散率，波長精度較高，分辨率可達0.2nm，但在可見光區要大于2nm，波長精度不線性。
　　
　　紫外分光光度計和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外--可見光照射被分析的有機物質，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進行定量分析。
　　
　　目前大部分光柵或分光光度計所用的光柵都是復制光柵，波長精度不太高，如754、722、752型分光光度計，波長精度在±2nm。近幾年出現了不少帶單片機的分光光度計，數據處理和操作功能大大加強，但基本原理沒有變。
　　
　　分光光度計是一種高阻儀器，所以怕潮濕，過高的空氣濕度將影響儀器的穩定性和電安全性，環境濕度一般控制在<85%。溫度對儀器也有一定影響，因儀器燈源本身具有熱量。當工作一段時間后，儀器本身溫度會增加，當環境溫度過高時會嚴重影響儀器讀數的穩定性和使用壽命。實驗室的溫度一般控制在10℃～25℃之間。在日常維護工作中要定期更換儀器的硅膠，定期開機，這樣才能保證儀器的正常使用和測量數據穩定可靠。