分光光度計作為一種精密儀器，在運行工作過程中由于工作環境，操作方法等種種原因，其技術狀況必然會發生某些變化， 可能影響設備的性能，甚至誘發設備故障及事故。因此，分析工作者必須了解分光光度計的基本原理和使用說明，并能及時發現和排除這些隱患，對已產生的故障及 時維修才能保證儀器設備的正常運行。
1)若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“99%”點。然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。
3)比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5)1900型等分光光度計，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數大，因而可以用于檢測微弱光 電信號，而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下，因此在 預熱時，應打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩。
6)放大器靈敏度換擋后，必須重新調零。
7)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法 如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色杯：700nm處裝蒸餾水， 將某一個池的透射比值調至99%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內則可以配套使用，若超出此范圍 應考慮其對測試結果的影響。
分光光度計分操作中容易出現的幾個典型故障及其排除方法：
1)儀器不能調零。可能原因：
a)光門不能*關閉。解決方法：修復光門部件，使其*關閉。
b)透過率“99%”旋到底了。解決方法：重新調整“99%”旋鈕。
c)儀器嚴重受潮。解決方法：可打開光電管暗盒，用電吹風吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑。
d)電路故障。解決方法：送修理部門，檢修電路。
2)儀器不能調“99%”。可能原因：
a)光能量不夠。解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈(盡管燈還亮)。
b)比色皿架未落位。解決方法：調整比色皿架使其落位。
c)光電轉換部分老化。解決方法：更換部件。
d)電路故障。解決方法：調修電路。
3) 測量過程中,“99%”點經常變動。可能原因：
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。
b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)。解決方法：送修。
4)數顯不穩。可能原因：
a)預熱時間不夠。解決方法：延長預熱時間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因，長時間處于工作狀態時，也會工作不穩)。
b)光電管內的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。
c)環境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。解決方法：改善工作環境。
d)光電管、電路等其它原因。解決方法：送修。
